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 獨一片提取工藝研究

 

  2012-12-6 17:29:21 瀏覽:12477 來源: 【字體: (右鍵暫停)  

 

摘要:“獨一味片”是由藏藥“獨一味”全草提取而得的浸膏片,用于治療外傷及風濕性關節炎疼痛等證,臨床療效確切。本文對獨一味片的提取工藝進行了篩選研究,確定了以總黃酮含量作為該工藝的質量檢測方法。

   “獨一味片”是蘭州醫學院與廣州白云山制藥總廠共同研制開發的純中藥制劑,是一種由藏藥獨一味提取而成的浸膏片。用于治療手術后、軟組織、關節及腰挫傷、小骨骨折、外傷、風濕性關節炎等,臨床療效確切。“獨一味”在民間廣泛用于骨折挫傷、筋骨疼痛、黃水病等。我們對獨一味片的制劑工藝、質量標準作了研究,結果報告如下:

1  實驗材料

1.1  藥材  獨一味,唇形科植物“獨一味”的全草。購自甘肅省藥材公司,經蘭州醫學院藥學系潘宣教授鑒定。

1.2   儀器  島津UV260紫外可見分光光度計,日本島津公司產品。

1.3   試劑  蘆丁,北京藥物生物檢定所提供,其余試劑均為分析純。

2  實驗內容

2.1  總黃酮的含量測定

2.1.1  對照品溶液的制備

   精密稱取干燥的蘆丁對照品200mg,100ml量瓶中,加70%乙醇70ml,于水浴上微熱使溶解,放冷,加乙醇至刻度,搖勻。精密啄吸取溶液10ml,置100ml量瓶中,加水至刻度,搖勻即得(每ml含無水蘆丁0.2mg)。

   精密吸取對照品溶液0.2,0.4,0.6,0.8,1.01.2ml,分別置于10ml量瓶中,各加水到3ml,PH4.5的醋酸——醋酸鈉緩沖液2ml0.1m三氯化鋁溶液2ml,混勻,加70%乙醇至刻度,混勻。按分光光度法(中國藥典1990年版一部附錄第51頁)在430nm波長處測定吸收度,并以吸收度為縱座標、濃度為橫座標,描繪標準曲線如圖:

2.1.3  樣品含量測定

   精密稱取本品0.52g干膏粉,置于圓底燒瓶中,精密加入70%乙醇100ml, 稱重,用70%乙醇調至原來的重量,濾過,棄去初濾液,精密量取續濾液1ml置于10ml量瓶中,按照標準曲線項下的方法自“加水至3ml”起依法測定吸收度,從標準曲線上讀出供試品溶液中總黃酮相當于蘆丁的重量,計算,即得本品中總黃酮相當于蘆丁的重量。

2.1.4  空白對照液的制備

   精密吸取70%乙醇1ml,置于10ml量瓶中,加水至3ml, PH4.5醋酸——醋酸鈉緩沖液2ml,0.1m三氯化鋁溶液2ml,混勻,加70%乙醇至刻度,混勻即得。

2.1.5   回收率的測定

   精密吸取樣品溶液0.3ml,共6份,分別置于10ml容量瓶中,各精密加蘆丁標準溶液0.5ml(0.1mg)按樣品含量測定項下操作、計算加樣回收率。結果:平均回收率為99.6%CV=0.62%

2.2  工藝研究

2.2.1  不同方法提取獨一味干膏的收得率及總黃酮含量的比較。

 取獨一味,分別以85水溫濅、100水煎煮、120加壓水提取和100水煎煮醇沉(含醇量30%)四種方法進行比較,每種方法投料5批,每批50kg,提取3次,時間分別為2h2h1h,濾過,濃縮至稠膏,干燥成干膏粉碎即得。結果如表1所示:

結果表明,85溫濅、100煎煮、120加壓提取三種方法中,隨溫度升高,干膏收得率相應提高,但無顯著差異(P>0.05,總黃酮含量中以100煎煮最高,與120加壓提取法比較有顯著性差異(P<0.01.干膏收得率以水提酮沉法最低,與其他三法相比較差異均有顯著性(P>0.05,總黃酮含量與100煎煮相比,差異無顯著性(P>0.05)。為降低成本,選用100煎煮法作為該制劑的提取工藝。

表一  干膏收得率及總黃酮含量比較(X±SD)

提取方法

干膏收得率(%

總黃酮含量(mg/g

85

26.6±3.0

49.9±0.9

100水煎煮

28.1±1.7

50.4±0.6

120加壓水提取

30.5±4.1

40.6±1.2

100水煎煮醇沉

20.3±0.6

55.3±0.7

2.2.2  100℃水煎煮3次干膏收得率及總黃酮含量的比較

獨一味5等份,每份50kg,加水煎煮3次,分別為2h2h1h,每次煎煮液分別過濾、濃縮成稠膏,干燥、粉碎即得。

2     水煎煮3次的干膏收得率及總黃酮含量

試驗次數

1

2

3

收得率(%

總黃酮(mg/g

收得率(%

總黃酮(mg/g

收得率(%

總黃酮(mg/g

1

19.5

50.6

6.8

49.8

2.6

49.4

2

18.1

51.5

6.7

48.4

2.7

50.8

3

17.3

52.1

6.8

50.0

1.4

50.9

4

19.2

50.0

7.3

49.5

2.7

50.3

5

17.8

50.8

9.0

50.8

2.8

51.5

X±SD

18.4±0.9

51.0±0.84

7.3±0.4

49.7±0.9

2.4±0.6

50.6±0.8

結果表明:獨一味煎煮3次,第3次干膏收得率為2.4%,與第1次、第2次相比,明顯下降;同時,黃酮久煎易破環。為節省工時,提高效率,獨一味以100℃提取、煎煮2次較為合適。

3  小結與討論

3.1  根據五批樣品測定,可知每克干膏總黃酮含量在40.655.3mg之間,該測定方法是可靠的。

3.2   獨一味片提取制備工藝是根據我廠大生產的情況篩選確定,采用常壓100℃水提取二次的方法達到提取有效成份,保證臨床療效,減少服用量的目的。

 

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